HVA ER PCR? HVORDAN FUNGERER PCR? HURTIG PCR Denne PCR-metoden bruker en raskere syklus, som vist i tabellen nedenfor, hvor tiden for 30 sykluser reduseres fra 70 til 30 minutter. Denaturation (95°C) Annealing (40° C - 60° C) Extension (72°C) Total time (30 cycles) Traditional PCR 45s 45s 45s ~70 minutes Quick PCR 30s 0s 30s ~30 minutes Materialer (Se side 6 for bilder) 778372 PCR, hurtig-PCR 778540 PCR-maskin EdvoCycler Jr., 16 x 0,2 ml rør 544150 Elektroforesekar M36 544124 Elektroforese-spenningskilde QuadraSource 067700 Mikrosentrifuge Capp, 6000 rpm 544450 Transilluminator, blått og hvitt lys, LED Mikrobølgeovn/komfyr Generelt laboratorieutstyr Is Framgangsmåte 1. 1) Bland 20 μL primerblanding, 5 μL DNA- prøve og 1 stk PCR EdvoBead 2. Amplifiser DNA-materialet ved hjelp av PCR som angitt i tabellen ovenfor 3. Forbered en agarosegel, plasser den i elektroforeseapparatet og tilsett buffer 4. Overfør DNA-materialet til gelen 5. Utfør gelelektroforese 5. Visualiser resultatet på en lysplate (etter tidligere farging, se bruksanvisningen) For mer informasjon om eksperimentet, se studieveiledningen som følger med settet. Spørsmål: Hvordan vil det påvirke resultatet hvis færre eller flere PCR-sykluser brukes? Hva er mulig kontaminering og hvordan vil en kontrolltest kunne avdekke mulig kontamineringen? 12 / frederiksen-scientific.no
Last ned PDF-fil